Separación De Una Mezcla De Aminoácidos Por Cromatografía En Capa Fina

Separación De Una Mezcla De Aminoácidos Por Cromatografía En Capa Fina

 Objetivo:

 Nuestro objetivo en esta práctica es intentar hacer una separación de los componentes de una mezcla y poder identificarlos. Para ello vamos a emplear la técnica de cromatografía en capa fina la cual es una técnica de separación de disoluciones que utiliza una fase móvil que se mueve a través de una fase estacionaria que es absorbente. No obstante dichas fases serán de un material u otro en función de la sustancia que queramos separar. Esta técnica emplea el método de capilaridad a la hora de arrastrar la muestra; en función de cada molécula está adoptará una posición u otra, gracias a esto podemos clasificar dichas moléculas

 Materiales:

-       Lámina de gel de agarosa

-       Disolvente de cromatografía

-       Disolución reveladora

-       Muestra problema con cantidad desconocida de aminoácidos

-       Muestra de patrón

-       Cubetas

-       Atomizador

 Procedimiento:

 ·1: Primero tenemos que colocar el disolvente en la cubeta

 ·2: Coger una placa de celulosa la cual tenemos que manipular con mucho cuidado para no dañarla, y después de recortar esta placa con las medidas adecuadas (10X5)

 ·3:  Realizar dos marcas en la placa a una distancia de 1,5 Cm entre si, y a una altura de 1 cm. A continuación tenemos que poner 2 microlitro de la muestra en un punto y en el otro otros dos microlitros del patrón, después tenemos que secar bien la muestra

 ·4: Cuándo ya se hayan secado la muestra, tenemos que poner la placa de celulosa sobre la base de la cubeta pero respetando siempre que la muestra este por encima del líquido disolvente. Luego tenemos que taparlo con la tapa y que así pueda subir el disolvente por capilaridad

 ·5: Cuando haya subido unos 8 cm, debemos retirar ya la placa de la cubeta,secar y marcar con lápiz hasta donde haya llegado la fase móvil y lo secamos en la estufa

 ·6: Ahora que la placa está seca, debemos echarle el revelador ya que lo que tenemos delante nuestra es una placa transparente y vamos a teñir hasta donde han llegado los componentes

 ·7: Por últimos vamos a calentar la placa a unos 105º durante dos minutos y tras este periodo de tiempo, vamos a comprobar cómo se han teñido perfectamente las manchas de aminoácidos

 Resultados:

 Ahora que ya hemos hecho la práctica, hemos medido hasta donde han llegado las marcar como ya hemos planteado antes y realizaremos la siguiente fórmula, para ver cual es la relación frente soluto, la cual es única de cada molécula y asi ver con que componente estamos trabajando.

Rf= Distancia recorrida por el compuesto desde el origen 

       Distancia recorrida por el eluyente desde el origen

 Galería: