DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DEL COLESTEROL

Objetivo:

En esta práctica vamos a hacer una determinación cuantitativa del colesterol de una muestra. Dicha determinació es una de las herramientas muy importante para el diagnóstico de lipemias. Recurriremos al método CHOD-POD, que es un método enzimático y colorimétrico. El principio del método se basa en esta reacción

Materiales:

- Los reactivos y el patrón que incluye el kit.

- Cubetas de espectrofotometría

-Espectrofotómetro

- Agua destilada

- Suero como muestra

-Micropipetas

-Gradilla

-3 tubos de ensayo de 3 mL

Procedimiento:

-1: Primero; preparamos el reactivo de trabajo disolviendo el contenido del vial R2 en el vial R1.

-2: A continuación colocamos los tubos rotulados ( como patrón, muestra y blanco) en la gradilla y añadimos en cada tubo:

-3: Por último dejamos incubar 10 minutos a tª ambiente y medimos la absorbancia en el espectrofotómetro, a una longitud de onda de 505 nm. Recordando que hay que emplear un blanco

Resultados:

Una vez concluida toda la práctica podemos ver que la cubeta a tomado un color rosado, el cual necesitaremos para medir a través del espectrofotómetro. Obtuvimos los siguientes datos:

Absorbancia de la muestra: 0,471

Absorbancia patrón: 0,354

Realizamos el siguiente cálculo:

Am/ Ap x200= mg/ dL de colesterol en la muestra

Y obtenemos de resultado: 266 mg/dL

Galeria: